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Cytoskeleton PHDG1-A說明書

更新時間:2018-08-17      點擊次數:2324

 

Cytoskeleton,Inc。很高興為藥物篩選,信號轉導和細胞骨架研究提供廣泛的試劑盒和產品。我們專注于生產純化蛋白質和易于使用的試劑盒,以研究生物化學和細胞過程。我們的試劑盒可用于少量樣品,用于基礎研究或小屏幕(Biochem Kits™),也可用于大屏幕的高通量樣品CytoDYNAMIX Screens™)。

除了我們現有的產品,我們還在產品線中為微管,微管蛋白,運動蛋白,小G蛋白效應物,GAP,GEF和其他幾種蛋白提供藥物篩選服務。

Acti-stain 488 phalloidin  Acti-stain 488鬼筆環肽

 

(Cat. # PHDG1-A)   300 Slides

產品用途包括

· 固定組織切片和組織培養細胞制劑中肌動蛋白絲的熒光染色。  注意:與許多肌動蛋白抗體不同,Acti-stain™488鬼筆環肽僅與F-肌動蛋白結合,導致低背景熒光。此外,通過Acti染色結合F-肌動蛋白在物種之間沒有明顯差異。

· 體外穩定熒光肌動蛋白絲的制備。

 

肌動蛋白染色在確定活細胞和固定細胞中細胞骨架的結構和功能方面非常有用。肌動蛋白細胞骨架在活細胞中是非常動態和不穩定的結構,但是在探測或染色肌動蛋白結構之前可以用多聚甲醛固定。 

 

材料

鬼筆環肽是來自蘑菇傘形毒蕈的七氨基酸肽毒素,其特異性地并且以高親和力(Kd 20nM)結合至肌動蛋白的聚合形式(F-肌動蛋白)。鬼筆環肽將肌動蛋白聚合的臨界濃度降低至小于1μg/ ml,從而充當聚合增強劑。鬼筆環肽已經用專有的綠色熒光染料標記,使其可用于染色組織培養細胞和組織切片中的肌動蛋白絲(1,參見圖1)和無細胞制劑。Acti-stain™488鬼筆環肽標記的肌動蛋白絲保留了未標記肌動蛋白的許多功能特征,包括它們與肌球蛋白相互作用的能力。Actin-stain TM 488鬼筆環肽以橙色固體形式提供。 

注意:鬼筆環肽是有毒的,必須小心處理(LD50人= 2mg / Kg)。

 

 

示例結果和規格

 

 

圖1.在瑞士3T3細胞中用Acti-stain TM 488染色的肌動蛋白應力纖維。

 

圖2. Acti-stain™鬼筆環肽的發射和激發掃描

 

 

 

 

 

 

 

用抗 - 紐蛋白(紅色),Dapi(藍色細胞核)和F-肌動蛋白染色的Swiss 3T3細胞用Acti-stain TM 488(綠色F-肌動蛋白,Cat。#PHDG1)染色。

 

Acti-stain TM 488的吸光度和熒光掃描。將標記的鬼筆環肽稀釋到甲醇中,并分別在350-750和500-750nm之間掃描其吸光度和激發光譜。吸光度峰值在500nm處,熒光在550nm處。

 

Acti-stain鬼筆環肽是可用的明顯的鬼筆環肽。表1描述了它們對F-肌動蛋白的亮度,光穩定性,背景和親和力常數。將這些性能特征與其他熒光鬼筆環肽進行比較,您將看到使用Acti-stain™來滿足肌動蛋白染色要求的優勢。

表1.熒光鬼筆環肽的生物化學特征

共軛

貨號

波長(Ex / Em)

亮度(AFU *)

光漂白的穩定性(以秒為單位的半衰期**)

背景 (總AFU在100nM時的百分比**)

親和力(Kd,納摩爾)

熒光毒傘素

na

485/535 FITC濾波器組

432

6

22

72 +/- 12

Acti-stain™488

PHDG1

485/535 FITC濾波器組

832

57

55 +/- 8

Acti-stain™535

PHDR1

535/585 TRITC濾波器組

430

27

12

36 +/- 7

Acti-stain™555

PHDH1

535/585 TRITC濾波器組

551

46

16

63 +/- 8

Acti-stain™670

PHDN1

640/680 Cy5濾光片組

332

8

18

50 +/- 12

* = AFU通過定量細胞成像測量。** =在沒有抗褪色的情況下在染色的Swiss 3T3細胞中測量。

 

引用:

oitbak等,2011。微小RNA在神經干細胞支持內皮形態發生中的作用。血管細胞v 3,p 25。

 

Yuan et al。,2012。使用同量異位標簽對胺代謝物進行亞秒級絕dui定量,以發現哺乳動物細胞中的通路活化。肛門。化學。第84頁,第2892-2899頁。

 

問題1:我可以使用熒光標記的鬼筆環肽染色活細胞中的F-肌動蛋白嗎?

答案1:  不幸的是,不,鬼筆環肽不能用于在活細胞中染色F-肌動蛋白。鬼筆環肽用于在固定細胞中染色F-肌動蛋白。熒光鬼筆環肽僅與F-肌動蛋白的天然四級結構結合,提供低背景。鬼筆環肽結合的正確固定條件是在PBS中的3.7%(v / v)多聚甲醛10分鐘,因為它保留了鬼筆環肽的高親和力結合所必需的季銨蛋白結構。甲醇固定破壞天然構象,因此不適合用鬼筆環肽染色F-肌動蛋白。為了監測活細胞中的肌動蛋白動力學,建議微量注射羅丹明標記的肌動蛋白(Cat。#APHR或AR05)。有關更多信息,請參閱這些數據表。

 

問題2:哪種熒光標記的鬼筆環肽穩定/亮?

答案2:  Acti-stains中亮和穩定的是Acti-stain 488(綠色熒光; Cat。#PHDG1)。有關我們所有Acti-stains的更多信息,請參閱下表。 

共軛

貓。#

波長(Ex / EM)

亮度(AFU)

光漂白的穩定性*(1/2秒壽命)

背景(總AFU在100 nM時的百分比)

Acti-stain™488

PHDG1

535分之485

832

57

Acti-stain™535

PHDR1

585分之535

430

27

12

Acti-stain™555

PHDH1

585分之535

551

46

16

Acti-stain™670

PHDN1

六百八十零分之六百四十

332

8

18

* =在沒有抗褪色的情況下測量。

 

 

貨號

品名

規格

品牌

BK165-S

Signal-Seeker™ SUMOylation 1 Detection Kit

(10 assay)

cytoskeleton

BK165

Signal-Seeker™ SUMOylation 1 Detection Kit

(30 assay)

cytoskeleton

BK163-S

Signal-Seeker™ Acetyl-Lysine Detection Kit

(10 assay)

cytoskeleton

BK163

Signal-Seeker™ Acetyl-Lysine Detection Kit

(30 assay)

cytoskeleton

BK160-S

Signal-Seeker™ Phosphotyrosine Detection Kit

(10 assay)

cytoskeleton

BK160

Signal-Seeker™ Phosphotyrosine Detection Kit

(30 assay)

cytoskeleton

BK162-S

Signal-Seeker™ SUMOylation 2/3 Detection Kit

(10 assay)

cytoskeleton

BK162

Signal-Seeker™ SUMOylation 2/3 Detection Kit

(30 assay)

cytoskeleton

BK161-S

Signal-Seeker™ Ubiquitination Detection Kit

(10 assay)

cytoskeleton

BK161

Signal-Seeker™ Ubiquitination Detection Kit

(30 assay)

cytoskeleton

AAC04-Beads

Acetyl-Lysine Affinity Beads

ea

cytoskeleton

APY03-Beads

Anti-Phosphotyrosine Affinity Beads

ea

cytoskeleton

ASM11-Beads

SUMOylation 1 Affinity Beads

ea

cytoskeleton

ASM24-Beads

SUMOylation 2/3 Affinity Beads

ea

cytoskeleton

UBA01-Beads

Ubiquitination Affinity Beads

ea

cytoskeleton

CIG02-Beads

Acetyl-Lysine Control Beads

ea

cytoskeleton

CIG03-Beads

SUMO1 IP Control Beads

ea

cytoskeleton

CIG01-Beads

IgG Control Beads

ea

cytoskeleton

CUB02-Beads

Ubiquitination Control Beads

ea

cytoskeleton

BLR01

BlastR™ Rapid Lysate Prep Kit

ea

cytoskeleton

BLR02

BlastR™ Rapid Filtration Kit

ea

cytoskeleton

AAC02

Acetyl Lysine Antibody Mouse Monoclonal (7B1)

ea

cytoskeleton

AAC03

Acetyl Lysine Antibody Mouse Monoclonal (19C4B2.1)

ea

cytoskeleton

AAC03-HRP

Acetyl Lysine-HRP Antibody Mouse Monoclonal (19C4B2.1)

ea

cytoskeleton

AAC01

Acetyl Lysine Antibody Mouse Monoclonal (3C6.08.20)

ea

cytoskeleton

APY03

Phosphotyrosine Antibody Mouse Monoclonal (27B10)

ea

cytoskeleton

APY03-HRP

Phosphotyrosine-HRP Antibody Mouse Monoclonal (27B10)

ea

cytoskeleton

ASM01

SUMO1 Antibody Mouse Monoclonal (Clone 5D8B16)

ea

cytoskeleton

ASM24

SUMO-2/3 Antibody Mouse Monoclonal (Clone 11G2)

ea

cytoskeleton

ASM23

SUMO-2/3 Antibody Mouse Monoclonal (Clone 12F3)

ea

cytoskeleton

ASM23-HRP

SUMO-2/3-HRP Antibody Mouse Monoclonal (Clone 12F3)

ea

cytoskeleton

AUB01

Ubiquitin Antibody Mouse Monoclonal

ea

cytoskeleton

AUB01-HRP

Ubiquitin-HRP Antibody Mouse Monoclonal

ea

cytoskeleton

PHDG1

Acti-stain 488 phalloidin

ea

cytoskeleton

PHDH1

Acti-stain 555 phalloidin

ea

cytoskeleton

PHDN1

Acti-stain 670 phalloidin

ea

cytoskeleton

BK001

Actin Binding Protein Spin-Down Assay Biochem Kit: rabbit skeletal muscle actin

ea

cytoskeleton

BK003

Actin Polymerization Biochem Kit (fluorescence format): rabbit skeletal muscle actin

ea

cytoskeleton

AKL95

Actin protein (>95% pure): rabbit skeletal muscle

ea

cytoskeleton

AD99

Actin protein (>99% pure): bovine cardiac muscle

ea

cytoskeleton

AS99

Actin protein (>99% pure): chicken gizzard muscle

ea

cytoskeleton

AKL99

Actin protein (>99% pure): rabbit skeletal muscle

ea

cytoskeleton

AKF99

Actin protein (pre-formed filaments): rabbit skeletal muscle

ea

cytoskeleton

AP05

Actin protein (pyrene labeled): rabbit skeletal muscle

ea

cytoskeleton

APHR

Actin protein (rhodamine): human platelet

ea

cytoskeleton

AR05

Actin protein (rhodamine): rabbit skeletal muscle

ea

cytoskeleton

AT01

Alpha-actinin protein: rabbit skeletal muscle

ea

cytoskeleton

RP01P

Arp2/3 protein complex: porcine brain

ea

cytoskeleton

CS-TFC01

Cardiac Thin Filament Complex (CTFC)

ea

cytoskeleton

CF01

Cofilin 1 protein: human recombinant

ea

cytoskeleton

HPG6

Gelsolin protein: Homo sapiens recombinant

ea

cytoskeleton

MH01

Heavy meromyosin protein

ea

cytoskeleton

CS-MH03

Heavy Meromyosin Protein (HMM Fragment)

ea

cytoskeleton

CS-MYS03

Myosin - cardiac S1 fragment

ea

cytoskeleton

CS-MYS04

Myosin - skeletal muscle S1 fragment

ea

cytoskeleton

CS-MYS05

Myosin - smooth muscle S1 fragment

ea

cytoskeleton

MY02

Myosin II protein: rabbit skeletal muscle

ea

cytoskeleton

MY03

Myosin protein: bovine cardiac muscle

ea

cytoskeleton

PR02

Profilin 1 protein: Untagged, human recombinant

ea

cytoskeleton

PHDR1

Rhodamine Phalloidin

ea

cytoskeleton

CY-SC001

SiR-Actin Kit

ea

cytoskeleton

CY-SC013

SiR700-Actin Kit

ea

cytoskeleton

VCG03

WASP protein VCA domain: GST tagged: human

ea

cytoskeleton

 

 

 

上海起發實驗試劑有限公司是實驗試劑一站式采購服務商

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