myPOLS Biotec正在開發新一代的DNA聚合酶
用于和可靠的應用,例如個性化醫療,病原體檢測,DNA和RNA診斷,法醫學等等。
我們的研發活動包括:
后但并非不重要:我們所有的酶和混合物都是在康斯坦茨內部生產的,并經過常規測試,符合高質量標準。
myPOLS Biotec是一家來自康斯坦茨大學的生物技術公司,來自Andreas Marx教授的研究小組。憑借我們在高通量DNA聚合酶設計方面的專業知識,我們為您的應用定制酶。
是原始Volcano DNA聚合酶的下一代,具有進一步改善的逆轉錄活性。該酶是一種工程化的,極其熱穩定的逆轉錄酶和組合的DNA聚合酶,通過定向的人工進化獲得。
Volcano2G DNA聚合酶直接從RNA模板促進“零步驟”RT-PCR(沒有等溫逆轉錄步驟),因為在循環PCR延伸步驟期間逆轉錄與DNA擴增同時發生。這也允許在高溫下進行逆轉錄反應,從而小化在高溫下熔化的RNA中的強二級結構遇到的問題。
文章 | 產品 | 尺寸 |
#8100S | Volcano2G DNA聚合酶 | 250 U,5U /μl,50μl |
#8100M | Volcano2G DNA聚合酶 | 1000U,5U /μl,200μl |
更簡單,更快捷:0步RT-PCR協議:
跳過逆轉錄步驟。不需要等溫反轉錄步驟。
Volcano2G是一種PCR活性逆轉錄酶,具有*的熱穩定性,在95°C的半衰期> 40 min。
當添加實時PCR染料時,Volcano2G DNA聚合酶也可用于實時PCR。Volcano2G具有Taq DNA聚合酶樣核酸酶結構域,因此也適用于基于水解探針的分析。如此處所示,通過使用基于探針的qPCR測定和零步驟RT-PCR方案,使用10倍稀釋系列的總RNA檢測NONO mRNA:
Volcano2G 5x反應緩沖液針對擴增子大小在60-300bp之間進行了優化。
當添加合適的實時PCR染料或熒光探針時,Volcano2G逆轉錄酶也可用于實時PCR。
這種*的酶能夠進行基于PCR的RNA檢測,無需單獨的逆轉錄步驟。
Volcano2G逆轉錄酶可以可靠地檢測≥1ng總RNA輸入的RNA靶標。
Volcano2G DNA聚合酶不需要Mn 2+ 以獲得宜活性。然而,通過向反應中添加Mn 2+可以進一步優化一些測定(建議的范圍是0.5-1mM,未提供Mn 2+)。
RT-PCR活性:測試Volcano2G DNA聚合酶活性的成功RT-PCR性能。在PCR循環儀中從人總RNA提取物擴增151bp片段(HPRT1 mRNA),并將其顯示為單一擴增產物。
DNA聚合酶活性:已經使用人工DNA模板和DNA引物監測Volcano2G聚合酶活性并將其調整為特定的DNA聚合酶活性。
通過蛋白質特異性染色確定酶濃度。有關批次特定濃度,請通過info@mypols.de查詢更多信息。
本產品采用冷藏包裝。請在抵達-20°C時存放產品。
應用
反應設置
零件 | 卷 | 終濃度 |
引物前移(10μM) | 1μl | 500 nM(50-1000 nM) |
引物反向(10μM) | 1μl | 500 nM(50-1000 nM) |
dNTPs(10 mM) | 2μl | 400μM |
5 x Volcano緩沖區 | 10μl | 1X |
Volcano2G DNA聚合酶5 U /μl | 1μl | 5-10 U /反應 |
模板/樣品提取物* | 各種μl | >(1-1000) |
不含核酸酶的水 | 總反應體積高達50μl |
|
將所有組件保存在冰上。
在使用前仔細旋轉并混合所有溶液。
*推薦的終模板濃度在5-50 ng /μl之間。
典型的0步RT-PCR方案(不需要等溫逆轉錄步驟)
步 | 溫度 | 時間 |
初始變性 | 95℃ | 2分鐘 |
變性 | 95℃ | 15秒 |
退火/延伸* | 各種* | 45秒(25-40周期) |
可選的熔化步驟 |
|
|
可以使用兩步法和三步法PCR方案。
*通過運行溫度梯度來理想地建立新的PCR,以便找到每個引物對的宜退火/延伸溫度。引物的退火溫度受其核酸序列和反應緩沖液組成(鹽和pH)的強烈影響。Volcano2G DNA聚合酶在50-95°C之間活躍。
上海起發實驗試劑有限公司是實驗試劑一站式采購服務商
1:強大的進口輻射能力,血清、抗體、耗材、大部分限制進口品等。
2:產品種類齊全,經營超過700多品牌,基本涵蓋所有生物實驗試劑耗材。
3:提供加急服務,貨品一般1-2周到貨。
4:富有競爭力的價格優勢,絕大部分價格有優勢。
5:多年積累良好的信譽,大部分客戶提供貨到付款服務??蛻舭ㄇ迦A、北大、交大、復旦、中山等100多所高校,ROCHE,阿斯利康、國藥、fisher等知藥企。
6:我們還是Santa,Advanced Biotechnologies Inc,Athens Research & Technology,bangs,BBInternational,crystalchem,dianova,FD Neurotechnologies,Inc. FormuMax Scientific,Inc, Genebridege, Glycotope Biotechnology GmbH; iduron,Innovative Research of America, Ludger, neuroprobe,omicronbio, Polysciences,prospecbi, QA-BIO,quickzyme,RESEARCH DIETS,INC,sterlitech;sysy,TriLink BioTechnologies,Inc;worthington-biochem,zyagen等幾十家國外公司授權代理。
7:我們還是invitrogen,qiagen,MiraiBioam,sigma;neb,roche,merck, rnd,BD, GE,pierce,BioLegend等知*批發,歡迎合作。
電話
QQ咨詢
4006551678